八臂迷宮實(shí)驗方法-僅供參考

八臂迷宮（放射臂迷宮（radial arm maze））實(shí)驗也是常用的評價(jià)動(dòng)物學(xué)習記憶能力的模型之一，由Olton等人于20世紀70年代中期建立。其基本依據是，控制進(jìn)食的動(dòng)物受食物的驅使對迷宮各臂進(jìn)行探究；經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的訓練，動(dòng)物可記住食物在迷宮中的空間位置。該方法可同時(shí)測定動(dòng)物的工作記憶（working memory）和參考記憶（reference memory）。所用動(dòng)物包括大鼠、小鼠和鴿子。這一模型對腦區毀損和多種藥物均很敏感。

（一） 實(shí)驗設備  實(shí)驗多數采用八臂放射迷宮，也有采用 十二臂或者二十四臂迷宮。這里介紹上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的八臂迷宮。每個(gè)臂長(cháng)41.9cm，寬11.4cm，高10.1cm；其上有一透明蓋，兩側各有兩個(gè)相對的光電管。迷宮中央八角形區的直徑為27.4cm；上有一透明頂蓋。中央區通往各臂的入口處有一活動(dòng)門(mén)，用來(lái)對動(dòng)物的出入臂進(jìn)行控制。迷宮與計算機相聯(lián)。也可用攝像跟蹤系統（video tracking system）取代光電管來(lái)記錄動(dòng)物在迷宮內的活動(dòng)行為。放置迷宮的房間內有一些外部暗示（extramaze cues）。動(dòng)物在迷宮內可以看見(jiàn)這些暗示，并借此進(jìn)行空間定位。實(shí)驗用大鼠或小鼠進(jìn)行。

（二）實(shí)驗方法

1．動(dòng)物適應實(shí)驗環(huán)境1周后，稱(chēng)重，禁食24小時(shí)。此后每天訓練結束后限制性地給予正常食料（據體重不同，大鼠16-20g，小鼠2-3g），以使體重保持在正常進(jìn)食大鼠的80%~85%。

2．第二天，迷宮各臂及中央區分撒著(zhù)食物顆粒（每只4~5粒，直徑約3~4mm）。然后，同時(shí)將4只動(dòng)物置于迷宮中央（通往各臂的門(mén)打開(kāi)）。讓其自由攝食、探究10min。

3．第三天，重復第二天的訓練。這一過(guò)程讓動(dòng)物在沒(méi)有很強的應激條件下熟悉迷宮環(huán)境。

4．第四天起，動(dòng)物單個(gè)進(jìn)行訓練：在每個(gè)臂靠近外端食盒處各放一顆食粒，讓動(dòng)物自由攝食。食粒吃完或10min后將動(dòng)物取出。

5．第五天，將食物放在食盒內，重復前一天的訓練，一天2次。

6．第六天以后，隨機選4個(gè)臂，每個(gè)臂放一顆食粒；各臂門(mén)關(guān)閉，將動(dòng)物放在迷宮中央；30s后，臂門(mén)打開(kāi)，讓動(dòng)物在迷宮中自由活動(dòng)并攝取食粒，直到動(dòng)物吃完所有4個(gè)臂的食粒。如經(jīng)10min食粒仍未吃完，則實(shí)驗終止。每天訓練兩次，其間間隔1h以上。

記錄以下幾個(gè)指標：

○1工作記憶錯誤（working memory errors）次數,即在同一次訓練中動(dòng)物進(jìn)入食物臂的總次數-1次；

○2參考記憶錯誤（reference memory errors ）次數，即動(dòng)物進(jìn)入不曾放過(guò)食粒的臂的總次數；

○3總的入臂次數；

○4成功進(jìn)入潛伏期，即動(dòng)物di一次進(jìn)入食物臂的時(shí)間；

○5錯入潛伏期，即動(dòng)物di一次進(jìn)入未放食物的臂的時(shí)間；

此外，計算機還可記錄動(dòng)物在放射臂內及中央區的活動(dòng)情況，包括運動(dòng)距離和運動(dòng)時(shí)間等。

連續5次訓練的工作記憶錯誤為零、參考記憶錯誤不超過(guò)1次時(shí)，可以開(kāi)始藥物測試或腦內核團結構毀損實(shí)驗。一般先給溶劑（如生理鹽水），再給削弱記憶的藥物（如東~~~~MK-801等），然后加用增強記憶的藥物，劑量由低到高。

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